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BD LSRFortessa™细胞分析仪是流式细胞仪的选择,具有强大的功能,性能和一致性。BD LSRFortessa的设计价格合理且可扩展,具有灵活性,可以满足不断增长的多色流式细胞术检测需求。
BD LSRFortessa™系统是满足大多数流式细胞仪分析仪需求的价格合理的选择,可配置多达7台激光器*-蓝色,红色,紫色,UV和黄绿色。激光波长的灵活性允许使用的荧光染料和底物优化分析设计。该仪器可使用一组定义的光学滤光片同时满足多达18种颜色的检测要求,这些光学滤光片可以满足或超过当今大多数测定要求。BD LSRFortessa是一种经过验证的创新平台,可进行多色分析。
BD LSRFortessa将久经考验的BD™LSR平台的功能置于紧凑的空间内。它可以轻松地安装在台式机上,以节省成本。
对于空间有限或空间成本高昂的实验室而言,这种空间效率甚至更为重要。除了减小尺寸外,设计增强功能还使访问带通滤光镜和反射镜更加容易,从而简化了对实验装置
BD LSRFortessa产品线整合了许多创新。流式细胞仪系统是流式细胞仪的心脏,具有真正的固定比对流动池,该流动池凝胶耦合至采集光学器件,以检测器信号
流体系统是压力驱动的。流体动力聚焦迫使样品池通过比色杯流通池,在该池中对其进行。流通池与激光器固定对准,并凝胶耦合至采集光学器件。这种设计可确保将激光精确地聚焦在样品流上,并且可以收集量的发射光,从而在多色应用中提高灵敏度。固定对准还可以地缩短启动时间,提高实验到实验的可重复性,并实现自动化的日常质量控制。
鞘管容器(8 L)和废液容器(10 L)在细胞仪外部,并放置在地板上以便于取放。
可选的BD FACSFlow™供给系统射流推车可增加容量并易于使用,同时保持稳定的射流压力。它包括一个自动化的鞘管和废液控制系统,通过结合两个20升容器(Cubitainers®)来减少日常维护。
流体传感器保持恒定的压力,而流体监测系统会在鞘液不足,排空或废液容器已满时发出警告。
比色皿流通池:石英比色皿流通池凝胶耦合至采集光学器件。这种设计有助于确保将激光精确地聚焦在样品流上,以产生的信号,并确保收集到量的发射光。
通过流动池对样品芯进行流体动力学聚焦
获得的采集光学器件是又一项设计创新。它们以八边形和三角形光学路径排列,其新颖的设计有效地使信号检测,并提高了灵敏度和分辨率。这使研究人员能够识别细胞,尤其是昏暗和稀有细胞群,优化多色分析和面板设计以获得优异的结果。
光学系统由照射样品中细胞的激光激发光学系统和将光散射和荧光信号通过光谱滤光片引导至检测器的收集光学系统组成。BD LSRFortessa系统中激发光学和收集光学的创新设计可减少激发损耗并优化收集效率,从而提高灵敏度和分辨率。
激发光学器件由多个固定波长的激光器,光束整形光学器件和单独的针孔组成,这些针孔会导致空间上分开的光束斑。
个透镜将激光聚焦到凝胶耦合的比色杯流通池中。由于光路和样品核心流是固定的,因此每天和实验之间的对齐方式都是恒定的。
凝胶耦合比色皿发出的光通过光纤传输到检测器阵列。收集光学器件设置在获得的八边形和三角形光学路径中,可地提高每个激光照射光束点产生的信号检测能力。每个PMT前面的带通滤光片允许对收集的波长进行光谱选择。重要的是,这种布置允许容易地在光学阵列内改变滤光镜和反射镜,并且不需要额外的对准就可以获得的信号强度。
八边形中的传播途径
常用荧光染料的发射光谱
该设计基于光反射比光透射更有效的原理。发出的光通过反射传播到每个PMT检测器,并仅通过两块玻璃透射到达检测器。因此,可以以最小的光损失检测更多的颜色。
BD FACSDiva™软件控制着来自BD LSRFortessa工作站的流式细胞术数据的高效设置,获取和分析。该软件在BD FACS™仪器系列(包括BD FACSCanto™细胞分析仪和BD FACSAria™系统)中通用。这为研究人员提供了更大的应用灵活性,使他们可以轻松地将测定从一个平台转移到另一个平台。
BD FACSDiva软件的细胞仪设置和跟踪(CS&T)功能可建立基线设置并针对仪器的可变性进行调整。该软件通过设置跨多个激光束的信号时间延迟并优化PMT电压来减少操作员错误,并确保结果的一致性。还可以设置特定于应用程序的设置,从而以更一致的方式快速设置和执行常规实验。该软件中的质量控制(QC)跟踪功能可测量仪器设置并报告性能。Levey-Jennings图可帮助用户了解仪器性能并确定维护问题。
BD FACSDiva软件使研究人员可以通过自动采集过程预览和记录多个样品的数据。采集模板,用户可定义的实验布局以及简单的补偿程序也由该软件管理,以进一步方便采集。
BD FACSDiva工作表显示了使用特殊配置的BD LSRFortessa分析仪获得的定义明确的T细胞群体子集,该分析仪配置有以下激光器:60 mW 355 nm紫外线,100 mW 450 nm紫光,100 mW 488 nm蓝光和40兆瓦640纳米红色。
为了进行分析,该软件包括强大的功能,例如分层捕捉门,各种绘图格式和批处理分析。可以通过在BD FACSDiva全局工作表上创建图,门,人口层次结构和统计视图来分析记录的数据。保存全局工作表后,就可以将其用于分析实验中的多个样品管,从而节省时间。其他许多生产力优势还包括用户可定义的批处理分析和自动功能,例如门调整大小,在数据文件之间暂停,导出统计信息以及在继续下一个数据文件之前进行打印。
为了改善实验工作流程,可选的BD™高通量采样器(HTS)可从96和384孔微量滴定板提供快速,全自动的样品采集。在高通量模式下,HTS选件可以在不到15分钟的时间内加快通过96孔板的速度,从一个孔到另一个孔的样品残留量不到0.5%。在研究应用中,低残留是的,以确保样品纯度和数据完整性。
通过同步两个高精度泵进行样品混合,样品注入和探针清洗,可以实现快速采集速度。可以选择标准通量模式来采集更大的样品量。
BD高通量采样器(HTS)
BD特殊订单研究计划允许客户配置BD流式细胞仪和,以满足精确的研究和测定需求。该计划是针对生物医学发现前沿的研究特殊需求而量身定制的,该程序提供了广泛的选择,以帮助研究人员根据自己的需求创建最终定制的仪器。
调节性T细胞的分析
调节性T细胞(Tregs)在维持免疫调节中起关键作用,并且在正常外周血中的数量很少(CD4 + T细胞的5-10%或总淋巴细胞的1-2%)。叉头盒P3(FoxP3)被认为是这种稀有细胞群的决定性标志。已知Treg可以表达的CD25。此处显示的CD4 + CD25 +(高)门控策略用于识别Treg种群。这些图表示使用8色面板从BD LSRFortessa采集的数据,该面板应用此门控策略来识别Fox P3阳性细胞。
人体血液分析
数据显示在具有蓝色,红色,紫色配置的3激光BD LSRFortessa上运行的10色面板。使用来自正常供体的裂解的全血(BD Pharm Lyse™裂解缓冲液),将面板用于定义T细胞亚群。BD Horizon™V450和BD Horizon V500染料的使用可使更亮的荧光染料用于表达较暗淡的抗原,而使用10种颜色则可扩大从单个试管中获得的信息量。