氨基酸分析液相色谱仪
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随着我国饲料工业的发展，鱼粉的需要量逐年增加，鱼粉的质量问题越来越引起饲料行业、养殖业的重视。鱼粉是水产饲料的主要蛋白源，尤其含有动物生长所必需的氨基酸，由于鱼粉用量大，价格高，有些厂家掺杂使假、以次充好，使鱼粉质量参差不齐，这一行为业给鱼粉品质分析带来了一定困难。因此，有必要建立一个有效的手段对鱼粉中氨基酸进行定量分析。
以下是鲁瑞科仪利用LC高效液相色谱仪对鱼粉进行的HPLC检测方案。
1、仪器与试剂
1.1仪器、设备
高效液相色谱仪
C18液相色谱柱250mm×4.6mm×5μm
分析天平
恒温箱，温度控制在110±1℃
微量进样器，（20μL）一支
漩涡混匀器
氮吹仪
针头过滤器
微孔滤膜：0.45µm
1.2试剂
盐酸溶液，6mol/L:将优级纯盐酸与水按1:1(V/V)混合。
氨基酸标准工作溶液。
乙腈，色谱纯。
三水合醋酸钠，优级纯。
冰醋酸。
正己烷，色谱纯。
2、供试品溶液和对照品溶液的制备
对照品溶液的制备 取氨基酸混合工作标液500ul，用水稀释至5ml，即得。
供试品溶液的制备 称取试样50-100mg（准确至0.1mg）于据塞试管中，加入6.0mol/l盐酸10ml，混匀，充分提取10min，盖紧盖子。将样品置于110℃恒温干燥箱中，水解22-24h。冷却后充分混匀，过滤。根据实验要求移取适量上清液，60℃下氮气吹干，备用。以下按照衍生方法包进行。
方法包衍生方法：将恒温水浴锅预热至50±1℃，分别将A、B两种衍生试剂用稀释至原来浓度的1/5倍。精密量取上述对照品1ml，至于试管中，加入稀释后的A溶液0.5ml和稀释后的B溶液0.5ml，摇匀；在50±1℃的水浴中加热45分钟，取出，加入正己烷溶液1ml，振摇；并用孔径为0.45μm有机膜过滤，放置30min后，取澄清的下层液进行分析实验。供试品的衍生步骤与对照品相同。
3、色谱条件
色谱柱：AA 4. 6 mmx250 mm，粒度5 µm
流动相：
流动相A：0.1mol/L醋酸钠溶液（pH6.5）：乙腈=93:7
配置方法：准确称取三水合醋酸钠13.6g于1000ml水中，搅拌均匀，溶解，用冰醋酸或氢氧化钠溶液调节pH值至6.5； 准确量取配制好的三水合醋酸钠溶液465ml和乙腈35ml，混合均与，抽滤，过0.45μm滤膜。
流动相B：水：乙腈=20:80。
配制方法：准确量取水100ml和乙腈400ml，混合均匀，抽滤，过0.45μm滤膜。
波长：254nm
流速：1. 0 mL/min
梯度设置：
| T（min） | A% | B% |
| 0.01 | 100.0 | 0.0 |
| 11 | 93.0 | 7.0 |
| 13.9 | 88.0 | 12.0 |
| 14 | 85.0 | 15.0 |
| 29 | 66.0 | 34.0 |
| 32 | 30.0 | 70.0 |
| 35 | 0.0 | 100.0 |
| 42 | 0.0 | 100.0 |
| 45 | 100.0 | 0.0 |
| 60 | 100.0 | 0.0 |
4、测定法
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得
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